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      ELISA試劑盒標準曲線的建立

      發布時間: 2023-05-09  點擊次數: 1602次

      很多老師第一次接觸ELISA實驗時,對于ELISA的標準曲線如何更好的建立可能會有疑惑。下面我們為大家提供2種建立標曲的方法。

      一、使用:CurveExpert 漢化版 V1.4 軟件作圖。

      1、下載好軟件并解壓。

            


      2、點擊圖標進入軟件后,將標曲OD值、標曲濃度復制粘貼進軟件中。

       

       


      3、選擇合適的方程建立標曲??蛇x擇 二項式、直線線性、四參數等方式擬合標曲。

           除非標曲做的特別好,誤差小、R值高,可以選擇直線線性擬合;一般都建議使用二項式擬合。

           下面我們使用二項式擬合。

      8.png


      4、點擊“ 二項式擬合"鍵,得到下圖,可以看到中間的曲線及右側標曲的R值=0.999

           再點擊左側的“Info"鍵,得到標曲的公式以及公式的系數。


      5、公式:Y=a+bX+cX^2

           X為已知樣本的OD值,a、b、c為標曲公式已知的系數,則Y為待求的樣本濃度。

           將上圖的公式帶入excel表格中,將樣本OD值帶入公式。


      6、點擊“回車"鍵,得到公式換算的樣本濃度。

           再將鼠標光標移到方框右下角,雙擊,將剩余的樣本濃度自動填充結果,結束計算。


      二、使用EXCEL表格“散點圖"作圖。

            首先選中標曲數據(1);

            點擊插入"(2);

            建立散點圖"(3);

            選擇圖右上角的圖表元素"(4);

            選擇趨勢線"(5);

           下一級的更多選項"(6);

           然后點擊畫面右側的多項式"或者線性",這里我們選擇多項式"建立標曲(7);

           再點擊下方的顯示公式"、顯示R平方值"(8);

           再建立公式,將樣本OD值,帶入得到的公式中(9),

           得到換算的樣本濃度。


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