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      綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒做標準曲線注意事項

      發布時間: 2020-08-18  點擊次數: 918次
         許多試劑檢測都涉及到標準曲線的問題,標準曲線做的好與壞會直接影響到實驗的結果,甚至是關系到實驗的成敗,那么究竟如何繪制或制作標準曲線呢?
        綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒做標準曲線樣品檢測時有幾個問題需要注意:
        1、樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的,所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結果無從談起。
        2、設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內,包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內。
        3、采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度,這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現較大的偏離。
        4、檢測標準樣品時,應按濃度遞增順序進行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。
        5、標準曲線的樣品數一般為7個點,但至少要保證有5個點。
        6、做出的標準曲線相關系數因實驗要求不同而有所變動,但一般來說,相關系數R至少要大于0.98,對于有些實驗,至少要0.99甚至是0.999.
        注意事項:
        1、試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
        2、濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
        3、各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間*控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
        4、請每次測定的同時做標準曲線,*做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
        5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
        6、底物請避光保存。
        7、嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
        8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
        9、本試劑不同批號組分不得混用。
        10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
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